超声波粉碎仪在链霉菌超声破碎时的方法条件

　　超声波粉碎仪可储存5个控制模式。且有定时数字显示，输出能量由光条显示，0～100%连续可调，操作直观方便。超声波粉碎仪工作方式有间断和连续两种选择，间断工作时，脉冲宽度和间断时间可分别设定。超声波粉碎仪的工作时间可由数字定时器控制，达到预定时间自动转变为待机状态，定时范围1min～99min。超声波粉碎仪可人为自由控制工作和截止时间，使用灵活方便，适用于少量样品的处理工作。
　　那么超声波粉碎仪在链霉菌超声破碎的，使用的方法条件是什么呢？
　　前处理一般就是配置成一定浓度的菌悬液。使用超声波粉碎仪进行超声破碎时采用的具体条件是：
　　1、取细菌的24 h培养液于5 000 r／min下离心5 min收集菌体；
　　2、用pH 7．5的Na2HPO-NaH2PO缓冲液洗涤3次，再用该缓冲液将菌体配成1：3的菌悬液．置于40 mL大塑料试管内；
　　3、将大塑料试管置于冰浴中，采用超声波破碎(功率200 W，1／2”探头，破碎30 s，间歇30 S)；
　　4、破碎液于12 000 r／min下高速冷冻离心30 min，收集细胞碎片和上清液，超声破菌流程与上述基本一致，就是洗涤菌体也可以用预冷的生理盐水或pH8的Tris－HCl，洗涤一次就可以。另外超声剂量随样品量、菌体改变比较大，功率可以到400－600w，超5s，停5s，冰浴，要加终浓度1 mM的PMSF。为确定合适的超声强度和次数，有必要随时镜检观察菌体是否*破碎。放线菌属于原核生物系统进化树上的（G＋C）摩尔百分含量（mol％）高的革兰氏阳性菌分枝类群。在做大肠杆菌超声时，采用的是400W超声波粉碎仪，超5停5的方法，效果不错，但是用在链霉菌上，似乎没什么效果，因为大肠杆菌式属于革兰氏阴性菌的。